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如何正确使用生化检测试剂盒？
118 人阅读发布时间：2025-11-10 13:26
正确使用生化检测试剂盒需要遵循一系列步骤和注意事项，以确保实验结果的准确性和安全性。以下是一些关键点：
一、选择合适的试剂盒
确认试剂盒的适用性，包括样本类型（如血清、血浆、组织等）、检测项目（如多酚氧化酶活性、血钾、甘油三酯等）。
检查试剂盒的资质，确保其具有国家食品药品监督管理总局的相关批号，以及相关的临床试验验证。
二、使用前准备
1、检查试剂盒
核对试剂数量、状态（粉体/液体）与说明书是否一致，确认有效期及保存条件（通常为2-8℃避光保存）
2、试剂平衡
将试剂盒（含标准品、酶结合物等）恢复至室温（约30分钟），避免冷凝影响浓度。冻干粉需短暂离心后溶解。
三、样本处理
血清/血浆：室温静置后离心，避免溶血；血浆需用EDTA抗凝剂，30分钟内分离。
尿液/细胞培养上清：离心取上清，避免沉淀干扰。
组织样本：液氮速冻后匀浆，离心取上清。
四、操作流程
1、加样
使用校准移液器，避免触碰孔壁，同批次实验用同一移液器。高危样本需在生物安全柜操作。
2、孵育与洗涤
覆盖封板膜，温度波动≤1℃，时间误差<5%。
手工洗板需拍干，自动洗板注液量≥300μl/孔，重复3-5次。
3、显色与读板
TMB显色液需避光，15-30分钟内终止反应。
终止后30分钟内双波长检测（如450nm主波长，630nm参比波长）。
五、注意事项
质控要求：每板需含空白孔、阴性/阳性对照及标准品梯度，R²值>0.99。
干扰因素：避免溶血、脂血样本影响结果。
废弃物处理：剩余样本及试剂需高压灭菌。
六、常见问题
假阳性/假阴性：可能因样本污染、洗涤不彻底或试剂过期导致。
试剂保存：开封后建议1个月内使用，粉剂溶解后需尽快使用。
通过以上步骤，可以确保生化检测试剂盒的正确使用，从而获得可靠、准确的实验结果。
一、选择合适的试剂盒
确认试剂盒的适用性，包括样本类型（如血清、血浆、组织等）、检测项目（如多酚氧化酶活性、血钾、甘油三酯等）。
检查试剂盒的资质，确保其具有国家食品药品监督管理总局的相关批号，以及相关的临床试验验证。
二、使用前准备
1、检查试剂盒
核对试剂数量、状态（粉体/液体）与说明书是否一致，确认有效期及保存条件（通常为2-8℃避光保存）
2、试剂平衡
将试剂盒（含标准品、酶结合物等）恢复至室温（约30分钟），避免冷凝影响浓度。冻干粉需短暂离心后溶解。
三、样本处理
血清/血浆：室温静置后离心，避免溶血；血浆需用EDTA抗凝剂，30分钟内分离。
尿液/细胞培养上清：离心取上清，避免沉淀干扰。
组织样本：液氮速冻后匀浆，离心取上清。
四、操作流程
1、加样
使用校准移液器，避免触碰孔壁，同批次实验用同一移液器。高危样本需在生物安全柜操作。
2、孵育与洗涤
覆盖封板膜，温度波动≤1℃，时间误差<5%。
手工洗板需拍干，自动洗板注液量≥300μl/孔，重复3-5次。
3、显色与读板
TMB显色液需避光，15-30分钟内终止反应。
终止后30分钟内双波长检测（如450nm主波长，630nm参比波长）。
五、注意事项
质控要求：每板需含空白孔、阴性/阳性对照及标准品梯度，R²值>0.99。
干扰因素：避免溶血、脂血样本影响结果。
废弃物处理：剩余样本及试剂需高压灭菌。
六、常见问题
假阳性/假阴性：可能因样本污染、洗涤不彻底或试剂过期导致。
试剂保存：开封后建议1个月内使用，粉剂溶解后需尽快使用。
通过以上步骤，可以确保生化检测试剂盒的正确使用，从而获得可靠、准确的实验结果。