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加标回收率实验的具体操作步骤
563 人阅读发布时间：2025-11-06 09:07
加标回收率实验是评估分析方法准确性的重要手段，其核心操作步骤如下：
1.样本制备
基础样本：取待测样本（如血清1mL），加入等体积不含待测物的溶剂（如双蒸水），制成基础样本。
加标样本：取相同体积待测样本，分别加入高、中、低三个浓度的标准液（加标体积≤原样本体积10%），制成3个回收样本。
2.实验检测
使用ELISA检测系统同时测定基础样本和3个回收样本，每个样本至少做3次重复测定，取均值作为测定浓度。
3.回收率计算
公式：回收率 = (测定回收样本浓度均值 - 测定基础样本浓度均值) / 加入浓度 × 100%。
平均回收率计算：
方法一（前处理时加标）：对同一样品的高、中、低浓度回收率取平均值。
方法二（前处理后加标）：取3个不同样品，每个样品做平行样，低浓度取3个样品回收率的平均值，中、高浓度分别取对应浓度的回收率。
4.注意事项：
加标体积需≤原样本体积10%，避免基质效应影响。
低浓度样本需避免前滞效应，高浓度样本需避免钩状效应。
基础样本应使用不含待测物的基质液稀释，确保结果准确性。
1.样本制备
基础样本：取待测样本（如血清1mL），加入等体积不含待测物的溶剂（如双蒸水），制成基础样本。
加标样本：取相同体积待测样本，分别加入高、中、低三个浓度的标准液（加标体积≤原样本体积10%），制成3个回收样本。
2.实验检测
使用ELISA检测系统同时测定基础样本和3个回收样本，每个样本至少做3次重复测定，取均值作为测定浓度。
3.回收率计算
公式：回收率 = (测定回收样本浓度均值 - 测定基础样本浓度均值) / 加入浓度 × 100%。
平均回收率计算：
方法一（前处理时加标）：对同一样品的高、中、低浓度回收率取平均值。
方法二（前处理后加标）：取3个不同样品，每个样品做平行样，低浓度取3个样品回收率的平均值，中、高浓度分别取对应浓度的回收率。
4.注意事项：
加标体积需≤原样本体积10%，避免基质效应影响。
低浓度样本需避免前滞效应，高浓度样本需避免钩状效应。
基础样本应使用不含待测物的基质液稀释，确保结果准确性。