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乳铁蛋白（LTF）ELISA试剂盒试剂制备
132 人阅读发布时间：2024-12-10 13:43
乳铁蛋白（LTF）ELISA试剂盒是一种用于定量检测生物样本中乳铁蛋白（LTF）水平的试剂盒。乳铁蛋白，也被称为乳铁传递蛋白（LTF），是转铁蛋白家族的一种多功能蛋白。乳铁蛋白是一种球状糖蛋白，分子质量约为80 kDa，广泛存在于各种分泌液中，如牛奶、唾液、眼泪和鼻腔分泌物。乳铁蛋白也存在于PMNs的次级颗粒中，并由一些尖顶细胞分泌。乳铁蛋白可从牛奶中提纯或重组生产。乳铁蛋白是人体免疫系统的组成部分之一；它具有抗菌活性（杀细菌、杀真菌），是先天防御的一部分，主要是在粘膜。乳铁蛋白与DNA和RNA、多糖和肝素相互作用，并在与这些配体的复合物中显示其一些生物功能。
乳铁蛋白是一种相对分子质量约为80 000的铁结合蛋白，属于转铁蛋白家族中的一员。乳铁蛋白是一种具有多种生理活性的天然蛋白质，参与调节免疫功能、抗微生物、调节铁吸收、促进肠道细胞增殖分化等多种过程。近年来，乳铁蛋白在婴幼儿中广泛应用。乳铁蛋白主要存在于母乳中，自身也可以合成。同时， 乳铁蛋白也可从乳制品、肉、蛋以及含强化乳铁蛋白的食品中摄取。通过母乳喂养或含强化乳铁蛋白的配方奶粉喂养的宝宝，由于消化系统尚不成熟，肠道内含有高浓度的乳铁蛋白，能够促进对铁和其他营养物质的吸收。随着宝宝长大，蛋白质消化功能提高，肠道中乳铁蛋白浓度也会降低。乳铁蛋白及其代谢产生的多肽能够对免疫修复具有正向调节作用；有抗细菌、真菌、病毒和寄生虫等微生物的作用；能够调节铁吸收、调节肠道菌群、抗氧化和抗炎等生理作用。
人乳铁蛋白ELISA试剂盒试剂制备：
1.浓缩稀释剂
提供的稀释剂溶液为5倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水稀释1:5。
2.浓缩洗涤液
提供的洗涤液为20X浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水稀释1:20。结晶当储存温度较低时，精矿中的形成并不罕见。浓缩液加温稀释前30-35°C可溶解晶体。
3.酶抗体结合物浓缩物
通过添加10µL计算每个微量滴定板测试条所需的工作标记溶液量酶抗体缀合物至990µL或1X稀释剂，用于每个测试条。立即稀释在使用前，并防止光线照射。混合均匀，但要轻柔。避免起泡。
4.TMB基板溶液
随附随用。
5.微量滴定板
随附随用。打开微量滴定袋并从袋中取出板。移除所有将不用于分析，将其放回袋中，并与干燥剂一起重新密封。
6.人乳铁蛋白校准仪
将1.0 ml蒸馏水或去离子水加入冻干人乳铁蛋白校准仪中，并轻轻混合直至溶解。校准器现在的浓度为18.40µg/mL（重新配制的校准器应为如果打算将来使用，则立即冷冻）。需要准备人乳铁蛋白校准品使用前立即。在每一步之间充分混合。避免起泡。
人乳铁蛋白ELISA试剂盒化验规程：
样品的稀释：
由于测定的高灵敏度，在用于正常测定之前，应稀释每个样品。A 1:20血清或血浆稀释适用于大多数样本，而母乳样本可能需要稀释1:50000。
对于产生校准曲线范围外结果的样品的绝对定量，取较小值或较大值可能需要稀释。如果不确定样品水平，则在之前用一个或两个代表性样品进行连续稀释强烈建议运行整个板。
为了制备1:20稀释的样品，将20µL样品转移到380µL 1X稀释剂中。这样可以得到1:20的稀释度。混合非常为制备1:50000稀释的样品，将5µL样品转移至495µL 1X稀释剂中。这给你一个1： 100稀释。充分混合。然后，将2µL的1X稀释剂转移至998µL，稀释1:100的样品。对样品进行1:50000稀释。在每个阶段充分混合。
乳铁蛋白是一种相对分子质量约为80 000的铁结合蛋白，属于转铁蛋白家族中的一员。乳铁蛋白是一种具有多种生理活性的天然蛋白质，参与调节免疫功能、抗微生物、调节铁吸收、促进肠道细胞增殖分化等多种过程。近年来，乳铁蛋白在婴幼儿中广泛应用。乳铁蛋白主要存在于母乳中，自身也可以合成。同时， 乳铁蛋白也可从乳制品、肉、蛋以及含强化乳铁蛋白的食品中摄取。通过母乳喂养或含强化乳铁蛋白的配方奶粉喂养的宝宝，由于消化系统尚不成熟，肠道内含有高浓度的乳铁蛋白，能够促进对铁和其他营养物质的吸收。随着宝宝长大，蛋白质消化功能提高，肠道中乳铁蛋白浓度也会降低。乳铁蛋白及其代谢产生的多肽能够对免疫修复具有正向调节作用；有抗细菌、真菌、病毒和寄生虫等微生物的作用；能够调节铁吸收、调节肠道菌群、抗氧化和抗炎等生理作用。
人乳铁蛋白ELISA试剂盒试剂制备：
1.浓缩稀释剂
提供的稀释剂溶液为5倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水稀释1:5。
2.浓缩洗涤液
提供的洗涤液为20X浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水稀释1:20。结晶当储存温度较低时，精矿中的形成并不罕见。浓缩液加温稀释前30-35°C可溶解晶体。
3.酶抗体结合物浓缩物
通过添加10µL计算每个微量滴定板测试条所需的工作标记溶液量酶抗体缀合物至990µL或1X稀释剂，用于每个测试条。立即稀释在使用前，并防止光线照射。混合均匀，但要轻柔。避免起泡。
4.TMB基板溶液
随附随用。
5.微量滴定板
随附随用。打开微量滴定袋并从袋中取出板。移除所有将不用于分析，将其放回袋中，并与干燥剂一起重新密封。
6.人乳铁蛋白校准仪
将1.0 ml蒸馏水或去离子水加入冻干人乳铁蛋白校准仪中，并轻轻混合直至溶解。校准器现在的浓度为18.40µg/mL（重新配制的校准器应为如果打算将来使用，则立即冷冻）。需要准备人乳铁蛋白校准品使用前立即。在每一步之间充分混合。避免起泡。
人乳铁蛋白ELISA试剂盒化验规程：
样品的稀释：
由于测定的高灵敏度，在用于正常测定之前，应稀释每个样品。A 1:20血清或血浆稀释适用于大多数样本，而母乳样本可能需要稀释1:50000。
对于产生校准曲线范围外结果的样品的绝对定量，取较小值或较大值可能需要稀释。如果不确定样品水平，则在之前用一个或两个代表性样品进行连续稀释强烈建议运行整个板。
为了制备1:20稀释的样品，将20µL样品转移到380µL 1X稀释剂中。这样可以得到1:20的稀释度。混合非常为制备1:50000稀释的样品，将5µL样品转移至495µL 1X稀释剂中。这给你一个1： 100稀释。充分混合。然后，将2µL的1X稀释剂转移至998µL，稀释1:100的样品。对样品进行1:50000稀释。在每个阶段充分混合。