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上海博湖生物科技有限公司
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试剂、抗体、细胞库 / 细胞培养、ELISA 试剂盒、技术服务
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公司新闻/正文
α-葡萄糖苷酶( α-GC)分光光度法试剂盒α-GC活力计算
人阅读 发布时间:2023-02-20 16:08
α-葡萄糖苷酶( α-GC)分光光度法试剂盒正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
测定意义:
α-GC是α-Glucosidase缩写,(EC 3.2.1.20)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化水解芳基或烃基与糖基之间的α-糖苷键生成葡萄糖,不仅与细胞壁的松弛或加固有关,而且与细胞识别和一些信号分子产生密切相关。
测定原理:
α-GC分解对-硝ji 苯-α-D吡喃葡萄糖苷生成对-硝基ben酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算α-GC活性。
α-GC活力计算:
标准条件下测定的回归方程为y =0.00543x -0.0027;x为标准品浓度(nmol/mL),y为吸光值。
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟产生1nmol对-硝基ben酚定义为一个酶活力单位。
α-GC活力(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(V样×Cpr)÷T
=61.39×(ΔA+0.0027) ÷Cpr
需要另外测定,建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒。
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟产生1nmol对-硝ji ben酚定义为一个酶活力单位。
α-GC活力(nmol/min /g鲜重)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(W×V样÷V样总)÷T
=61.39×(ΔA+0.0027) ÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟产生1nmol对-硝ji ben酚定义为一个酶活力单位。
α-GC活力(nmol/min /104 cell)=[(ΔA+0.0027) ÷0.00543×V反总]÷(500×V样÷V样总)÷T
=0.123×(ΔA +0.0027)
V反总:反应体系总体积,1mL;V样:加入反应体系中样本体积,0.1mL;V样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g; 500:细胞或细菌总数,500万;T:反应时间,30min。
测定意义:
α-GC是α-Glucosidase缩写,(EC 3.2.1.20)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化水解芳基或烃基与糖基之间的α-糖苷键生成葡萄糖,不仅与细胞壁的松弛或加固有关,而且与细胞识别和一些信号分子产生密切相关。
测定原理:
α-GC分解对-硝ji 苯-α-D吡喃葡萄糖苷生成对-硝基ben酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算α-GC活性。
α-GC活力计算:
标准条件下测定的回归方程为y =0.00543x -0.0027;x为标准品浓度(nmol/mL),y为吸光值。
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟产生1nmol对-硝基ben酚定义为一个酶活力单位。
α-GC活力(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(V样×Cpr)÷T
=61.39×(ΔA+0.0027) ÷Cpr
需要另外测定,建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒。
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟产生1nmol对-硝ji ben酚定义为一个酶活力单位。
α-GC活力(nmol/min /g鲜重)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(W×V样÷V样总)÷T
=61.39×(ΔA+0.0027) ÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟产生1nmol对-硝ji ben酚定义为一个酶活力单位。
α-GC活力(nmol/min /104 cell)=[(ΔA+0.0027) ÷0.00543×V反总]÷(500×V样÷V样总)÷T
=0.123×(ΔA +0.0027)
V反总:反应体系总体积,1mL;V样:加入反应体系中样本体积,0.1mL;V样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g; 500:细胞或细菌总数,500万;T:反应时间,30min。