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Elisa试剂盒使用前需做好哪些准备工作
8 人阅读发布时间：2025-12-10 09:28
ELISA（酶联免疫吸附测定）是一种高灵敏度的生物化学检测技术，其结果受操作细节影响极大。实验前的充分准备是成功的关键，能有效减少误差、避免假阳性或假阴性结果。使用ELISA试剂盒前，你需要做好这些准备：
1、试剂盒的保存与恢复：确保试剂盒在2-8℃的条件下保存，并在使用前至少放置室温平衡30分钟，尤其是浓缩的洗涤液和酶标板，以避免温度差异导致的反应不一致。
2、标准品和样本的准备：
标准品：按照说明书要求，将标准品用标准品稀释液进行适当的稀释，注意每次稀释后应充分混匀，并且稀释后的标准品不应保存。
样本：根据样本类型（如血清、血浆、细胞上清液等）进行适当的前处理，如离心去除沉淀，确保样本中无溶血、无脂血、无污染，并按说明书要求进行稀释。
3、试剂平衡与检查
将试剂盒从冰箱取出，在室温下平衡至少20-30分钟。同时，按试剂盒清单核对所有组分是否齐全，确保没有遗漏或损坏。
4、试剂配制
根据说明书配制必要的试剂，如洗涤液（浓缩液需按比例稀释）、标准品（冻干品需用稀释液溶解并梯度稀释）以及抗体工作液（需现配现用）。使用前，所有试剂管（包括冻干标准品）应离心数秒，使液体集中到管底。
5、洗涤液的准备：浓缩洗涤液使用前需恢复至室温并用蒸馏水或去离子水稀释至适当倍数，如说明书要求的20倍稀释。
6、工具的准备：准备好微量加样器、吸头、洗板机（如果有）、酶标仪、吸水纸等实验所需工具，并确保微量加样器校准正确。
7、实验记录的准备：记录实验日期、试剂批号、样本信息等，以便追踪实验条件和结果。
务必严格遵循您所使用的特定ELISA试剂盒的说明书进行操作。不同品牌和类型的试剂盒（如双抗体夹心法、竞争法、一步法）在细节上可能存在差异。做好复孔和标准曲线是保证数据可靠性的基础。
1、试剂盒的保存与恢复：确保试剂盒在2-8℃的条件下保存，并在使用前至少放置室温平衡30分钟，尤其是浓缩的洗涤液和酶标板，以避免温度差异导致的反应不一致。
2、标准品和样本的准备：
标准品：按照说明书要求，将标准品用标准品稀释液进行适当的稀释，注意每次稀释后应充分混匀，并且稀释后的标准品不应保存。
样本：根据样本类型（如血清、血浆、细胞上清液等）进行适当的前处理，如离心去除沉淀，确保样本中无溶血、无脂血、无污染，并按说明书要求进行稀释。
3、试剂平衡与检查
将试剂盒从冰箱取出，在室温下平衡至少20-30分钟。同时，按试剂盒清单核对所有组分是否齐全，确保没有遗漏或损坏。
4、试剂配制
根据说明书配制必要的试剂，如洗涤液（浓缩液需按比例稀释）、标准品（冻干品需用稀释液溶解并梯度稀释）以及抗体工作液（需现配现用）。使用前，所有试剂管（包括冻干标准品）应离心数秒，使液体集中到管底。
5、洗涤液的准备：浓缩洗涤液使用前需恢复至室温并用蒸馏水或去离子水稀释至适当倍数，如说明书要求的20倍稀释。
6、工具的准备：准备好微量加样器、吸头、洗板机（如果有）、酶标仪、吸水纸等实验所需工具，并确保微量加样器校准正确。
7、实验记录的准备：记录实验日期、试剂批号、样本信息等，以便追踪实验条件和结果。
务必严格遵循您所使用的特定ELISA试剂盒的说明书进行操作。不同品牌和类型的试剂盒（如双抗体夹心法、竞争法、一步法）在细节上可能存在差异。做好复孔和标准曲线是保证数据可靠性的基础。