科研工作离不开抗体，WB、IP/CHIP、IF/IHC和FC实验都需要用到抗体，那么这几种实验对抗体有什么不同的要求？以下来了解它们分别需要什么样的抗体。
1、WB
WB的蛋白经过加热变性之后都变成线性的结构。因此*好的抗体是采用非常特异序列的人工合成多肽的方法来做实验，结果也非常特异。
2、IP/CHIP
我们用抗体去结合生理状态下的蛋白质，因此IP的抗体最好使用纯化的天然蛋白制作的抗体来做，也可以用纯化的重组蛋白的抗体。最好不要用人工合成多肽制作的抗体，因为这种抗体识别的位点可能被深深地藏在了蛋白的内心深处。CHIP和IP没有太大的区别，唯yi的问题在于，如果抗体识别的表位和该蛋白质与DNA结合的部位一致，则会导致CHIP实验的失败。
3、 IF/IHC
免疫荧光和免疫组化中需要进行固定一步，固定是为了尽量让细胞的形态结构维持和原有的一致。这种化学物质的固定使蛋白质变性凝固，与天然状态下的蛋白质有了一定的区别，但是又不同WB中加热变性变成了线性的结构。因此在做IF/IHC实验中，最合适的抗体可以是纯化的重组蛋白得到的抗体，也可以是人工合成多肽得到的抗体（多肽是在蛋白质的表面）
4、FC
流式细胞中分为两种，一种是活细胞的流式，这种流失最好采用是天然蛋白或者重组蛋白的抗体来做，另外一种是经过固定之后的流式，和IF/IHC 所用抗体一致。在做流式细胞中，我们有直接标记和间接标记，间接标记不如直接标记真实准确。因此我们选择流式抗体要采用带有荧光标记的抗体；如果研究的蛋白没有直接标记的抗体，那么就采用间接标记抗体，需要添加荧光二抗。
解答抗体选取相关问题：
1. 做流式的抗体和免疫组化的抗体是一样的吗？
不一定能通用。流式是用直接标记还是间接标记？如果是直接标记的话，那这个抗体一般不是FITC标记或者就是TRITC，PE之类的。如果恰好你的免疫组化，也是想用荧光素标记的抗体来直接标记，那就可以通用。如果你的免疫组化要用其它的标记的话，或者是间接标记的话，就有麻烦，因为荧光素的标记很可能会影响二抗和一抗的结合。
2. 为什么我的抗体做WB非常好，而做不了IF，IHC等其他任何实验？
首先恭喜你有一个WB非常好的抗体，毕竟能获得做WB非常好的抗体也不容易。其次，你这个抗体很可能是通过人工合成多肽得到的，和上面所述，你用来做抗原的多肽恰好被包埋在蛋白质的中心，因此只能识别WB中线性的部分。
3. 如何选择免疫组化抗体？
首先，一抗是选择单克隆抗体还是多克隆抗体，单克隆抗体特异性强，灵敏度低；多克隆抗体灵敏度高，特异性弱。根据你的实验结果，如果非特异多，那么选择单克隆抗体；如果阳性信号弱，不妨选择多克隆抗体试试。一般家兔来源的都是多克隆，小鼠来源的是单克隆。其次是要弄明白该一抗能够识别什么种属的抗原，抗体说明书上面一般注明有，比如小鼠Mus, 大鼠Rat, 人Hum。再次比较重要的是要注意一抗的来源。比如我们在人的癌组织中做p53的免疫组化，一抗我们采用的是小鼠来源的p53抗体，那么二抗我们一定要选择抗小鼠的二抗比如（山羊抗小鼠，兔抗小鼠），这一点非常重要。最后，一般的抗体说明书都会注明能做什么实验，如果标明了不可以做免疫组化，一定不要选择；反过来说，即使标明了可以做免疫组化，也不一定能够做，商家只会夸大其效果。
4. WB和IF的二抗是一样的吗？
很明显，不是！免疫荧光抗体是用于 免疫荧光试验的，是用FITC或PE等标记的抗体，结果需要紫外线激发并用荧光显微镜观察WB抗体一般是HRP或碱性磷酸酶等标记的抗体，需显色底物（如OPDTMB等）直接显色（肉眼）或化学发光法显影（需特殊仪器）。
5. 做CHIP的抗体是否可以用来做WB抗体？
不一定，一般来说做CHIP级别的抗体对抗体纯度特异性方面都要求比较高，基本上能做CHIP的抗体都可以做WB。但是如果CHIP的抗体识别的是构象表位（比如是由两个实际靠在一起但变为线性结构之后相隔很远的两端序列），而不是线性表位，这种CHIP抗体做不了WB。
6. 抗体说明书上面没有写该抗体能够用于某项实验怎么办？
一般而言，抗体研发出来之后都要经过WB，IP，IF，IHC实验。档发现浓度不够做IF，IHC时候，国外的抗体一般都是写未检测，国内的抗体一般是不写。所以尽量不要抱着试试的心里去尝试，往往只会浪费时间。你想啊，如果抗体能够做该实验，他们肯定会写上去啊。
7. 做ELISA的抗体能否用来做WB？
通常用WB抗体稀释浓度为1:1000，IF/IHC为1:100，而如果可以做ELISA则可以稀释1:10000。如果一个抗体用来做ELISA的，那么言外之意就是该抗体效价不高。但不是说ELISA的抗体不能用于做WB，抗体说明书提示做ELISA稀释比例为1:1000，那么你可以试试1:100做做WB。