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细胞污染的原因,以及解决办法!

发布时间:2020-07-28 11:50 |  点击次数:

 细胞培养最关bai键的还是操作,如果操作规范的话du,污染几率是很小的,如zhi果在培养的时候总是有dao黑色点状物质,可以考虑是不是细胞碎片或者血清里的蛋白质沉淀。
细胞污染的原因:
1.天气太热,实验者在培养和接种或者换液时出汗(有空调稍好,但是手也出汗)。
2.培养间里可能暗藏污染原。
3.注意培养箱(这点最重要),仔细检查培养箱里的隔板的下面,有可能有霉菌斑。(我以前遇到过)
4.培养基污染多数是配置过程中造成的,仔细检查配置过程用到的器具。
5.血清过期一个月,如果保存的好应该没有问题,但是保存不好,新来的血清,用一次就可能污染。血清过期和污染是否有必然的联系不好说,我们觉得联系不大。
解决办法:
1.彻底清洁培养间,显微镜室。然后,紫外灯多照射一端时间消毒空气。
2.彻底清洁培养箱:(1)每个隔板仔细清洗,火烤。(2)培养箱大换水,换成新鲜干净的蒸馏水。(3)培养箱内壁用酒精棉球或者稀guo氧乙酸认真擦洗。(4)紫外灯长时间照射(一天)。
3.实验用器械消毒:注意消毒时间和压力,有必要检查压力锅和校正压力表是否准确。
4.一次性手套在打开使用前一天放入无菌间照射消毒。
5.如果用双抗,应该现用现配。
6.注意过滤器的消毒灭菌。
7.经验告诉我们过期1年内的血清,只要保存妥当,其实血清的效价是不会降低的;还有刚购买的大规格的血清收到后,避免反复冻融,血清分装的时候要无菌分装,转入无菌间,在超净台内将血清分装入50-100ml血清瓶中封口,并于-20℃保存备用。分装时注意:① 预先要将血清轻轻摇动数周、混匀;② 用吸液管吹出血清时要注意:③ 不要吹出气泡,血清很粘稠,很容易产生气泡。如果产生气泡,则在酒精灯火焰上过一下。
8.检查培养间和超净台的通风过滤网,如果脏了,需要更换。