视网膜神经细胞凋亡研究结果讨论

讨论
尼莫地平属于第 2 代二氢吡啶类钙拮抗剂， 具有脂溶性高， 溶解度低， 可以透过血 - 脑屏障、胎盘屏障等生理屏障，已在临床广泛应用。1998 年 PILTZ最早应用于正常眼压性青光眼（normal tension glaucoma,NTG）患者 100 例，通过对视野范围和视敏度及视力的观察， 表明尼莫地平对 NTG 患者具有一定疗效。随后相似的研究进一步观察 NTG 的视网膜血液循环，表明 NMD 改善了 NTG 患者的视网膜血液循环。
大量的实验室也证实 NMD 具有保护神经节细胞，减少凋亡发生。但临床的病例对照性研究中似乎并不是那么理想，因为口服给药需经过消化道吸收，其口服生物利用度低。NMD 对神经外科蛛网膜下腔出血早期给药可以减少脑血管痉挛的发生。H?NGGI通过制备尼莫地平 - 聚乙二醇（Nimodipine-poly（DL-lactide-co-glycolide）, PLGA）悬液，将极低剂量的NMD-PLGA 注入小鼠和狗脑池内，分别检测 29 d 血清和脑脊液， 取得持久的 NMD 浓度，也通过对 SAH 模型狗的治疗，降低了脑血管痉挛的发生。该缓释制剂减少静脉给药所引起的低血压等并发症的发生，也避免口服给药较低的生物利用度。
球周注射给药是眼科常用的并熟练掌握的给药途径，可以在眼内及局部达到有效、稳定的药物浓度，是口服给药难以达到的，也是静脉给药难以保障的。本实验显示，尼莫地平注射液球周注射，具有较好的 RGCs 保护作用。
细胞凋亡是凋亡基因控制下发生的，研究最广泛的 Bcl -2 是抑制凋亡基因，Bcl-2/Bax 比值对细胞凋亡发生与否起决定性作用。本研究显示，Bcl-2在各组间有差异，NMD可以上调 Bcl-2因子的表达，而保护RGCs的凋亡。Bax 表达量在 B、C 两组呈高表达，而在 D、E 两组呈低表达，D、E 两组与 B、C 两组比较有差异，证实NMD 可以通过下调 Bax 表达抑制凋亡。在 3 种剂量之间，低剂量与中、高剂量比较有差异，而中高剂量比较无差异，该点与 TUNEL 检测结果与此相似，即 D、E 两组阳性细胞表达量P>0.05，提示NMD 在0.25 mg 时便可发挥有效的保护作用， 增加剂量并不能抑制凋亡的发生，可能的机制是 NMD 抑制钙离子内流的能力和细胞外钙离子内流的趋向力存在一定浓度差，当大于这一差值时钙离子内流难以抑制。本实验未给予更高浓度的剂量，该剂量相关性的上限并未显示。一但凋亡机制启动， 凋亡将可能不可避免的发生。
实验显示，采用 NMD 注射液球旁注射对慢性青光眼兔 RGCs 具有保护作用， 可能通过抑制钙离子内流上调 Bcl-2 表达，下调 Bax 表达。NMD 球周注射还可以通过增加眶内段视神经周围的药物浓度，通过轴浆运输到达中脑上丘。
青光眼的神经保护是从视路性疾病的角度出发，目前研究认为 CCBs 在中枢神经系统无论是外伤性及退行性变是有积极意义的。本实验 NMD 球周注射向临床治疗提供新的思路，局部高浓度的 NMD 是神经保护的重要条件，但多次注射仍会受到限制，未来缓释系统的研发将会降低注射的次数，这将会使 NMD眼局部给药成为理想的给药途径。