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猪圆环病毒I型PCR试剂盒说明书

17 人阅读发布时间:2021-09-03 11:52

猪圆环病毒I型PCR试剂盒说明书

试剂盒组成及试剂配制:
  1.  酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。 
    2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
    3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
    4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
    5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
    6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
    7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
    8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
    9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
    10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)
样本处理及要求:
1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.  血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.  组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4.  细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。


注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
3.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔di一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物请避光保存。
6.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
8.本试剂不同批号组分不得混用。
9.不能使用过期产品。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。 
每个样品测试反应体系配制见下表 2。
2 每个样品测试反应体系配制表

注:本公司提供试剂盒免费代测服务。需要其他检测试剂盒请咨询销售人员。



 
资料格式:

猪圆环病毒I型PCR试剂盒说明书.doc

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